證券簡稱:海能技術
證券代碼:430476
       
       

凱氏定氮法測定骨膠原肽中蛋白質含量

1 前言

鮮骨含有人體需要的多種營養物質,但不易直接食用,利用酶法將骨膠原蛋白水解成骨膠原多肽,有利於人體消化吸收。在《5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定》中蛋白質測定方法有凱氏定氮法,分光光度法以及燃燒法。其中以凱氏定氮法應用最爲廣泛。凱氏定氮法是將樣品中的有機態氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下,轉化爲氨態氮。加鹼蒸餾後,用硼酸吸收後,再以鹽酸或硫酸標準滴定液進行滴定,具有結果準確等優點。但傳統的玻璃儀器具有操作繁瑣,耗時長,危險性高等缺點。本文以全自動凱氏定氮儀進行實驗,結果準確,操作簡單。

2 儀器與試劑

2.1儀器

K1160全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀



2.2試劑

硫酸(分析純),硼酸(分析純),氧化鈉(分析純),溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片),0.1mol/L鹽酸標準滴定液。

3 實驗方法

3.1取樣

0.2g左右樣品,加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml

3.2消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化完畢後,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程採用曲線升溫模式,設置參數如下:






3.3 上機測試

待消化管內溶液冷卻至室溫後,將消化管放置於定氮儀上。定氮儀設置程序如下:


式中:c-標準酸摩爾濃度(mol/L)

W-樣品質量(g

V0-空白樣滴定標準酸消耗量(mL

V-樣品滴定標準酸消耗量(mL),精確到小數點後四位








4.2結論

通過數據可知,利用全自動凱氏定氮法測定骨膠原肽粉中的蛋白質含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節省人力等優點。

參考文獻

[1]GB 5009.5-2016 食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定[S].

注意事項

樣品中蛋白含量較高,取樣及消解時應注意減少誤差。可以用稱量紙包裹住樣品投入消化管中,以防止樣品粘在消化管上部。實驗過程中濃酸濃鹼較爲危險,請小心操作。