證券簡稱:海能技術
證券代碼:430476
       
       

凱氏定氮法測定疫苗中蛋白質含量


1 前言

疫苗是指爲了預防、控制傳染病的發生、流行,用於人體預防接種的疫苗類預防性生物製品。而疫苗中大都會含有大量蛋白質。常規的蛋白質測定方法有凱氏定氮法,分光光度法以及燃燒法,其中以凱氏定氮法應用最爲廣泛。但傳統的玻璃儀器具有操作繁瑣,耗時長,危險性高等缺點。下面以禽流感疫苗爲例,採用《中國藥典》2015年版中氮測定法第三法以全自動凱氏定氮儀進行實驗,操作簡單,測得結果平行性良好。

2 儀器與試劑

2.1仪器

K1100F全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀

       

2.2试剂

硫酸(分析純)、硼酸(分析純)、氫氧化鈉(分析純)、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片)、0.1mol/L硫酸標準滴定液等。

3 实验方法

3.1取样

精確量取2ml樣品放入消化管中,並用純水沖洗消化管壁,防止殘留,加一片催化劑片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再加硫酸10mL。同時做空白實驗。

3.2消解

利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化完畢後,將消化管取下冷卻至室溫。消解過程設定消解溫度參數如下表:






4 結果與討論

4.1实验结果

仪器自动滴定并计算,计算公式如下:

式中:C-标准酸摩尔浓度(mol/L)

V-樣品體積(mL)

V0-空白樣滴定標準酸消耗量(mL)

V-样品滴定标准酸消耗量(mL)

6.25-样品蛋白系数


4.2实验结论

通过以上测得数据可知,利全自動凱氏定氮測定疫苗中蛋白質含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節省人力等優點