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凱氏定氮法測定小白鼠飼料中蛋白質含量


1 前言

小鼠應餵給顆粒性飼料,即將麥粉、玉米麪、麥麩、豆餅、魚粉、草粉等按配方混合後製成乾燥塊料或粒料。小白鼠的食量雖小,但對飼料質量的要求相對較高,必須保持營養物質的平衡穩定,富有蛋白質等,否則對其發育、繁殖和抗病能力會造成嚴重影響。

2 实验部分

2.1原理

樣品在濃硫酸和催化劑的共同作用下,由有機態的氮轉化爲氨態氮。加鹼蒸餾後,用硼酸吸收後,再以硫酸標準滴定液進行滴定。

2.2 仪器与试剂、器具

2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.3 硫酸 分析純,c(HCL)=0.1mol/L,標準滴定液。

2.2.4 硼酸 分析纯,质量分数2%。

2.2.5 氫氧化鈉 分析純,質量分數40%。

2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5+1體積比臨時混合搖勻備用。

2.2.7 催化剂片 3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片

2.2.8 10ml移液管

2.2.9 称量瓶

2.2.10粉碎机

2.3 实验部分

2.3.1製備:將用粉碎機打碎且混合均勻的樣品稱取0.5g左右,用稱量紙包好後一併投入消化管中,加一片催化劑片(或者3g硫酸鉀、0.2g硫酸銅),加入10ml濃硫酸。

2.3.2消解:利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化完畢後,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程採用直線升溫模式,逐漸升溫至420度,消解1小時。

2.3.3 待消化管內溶液冷卻至室溫後,將消化管放置於定氮儀上。定氮儀設置程序如下:

硼酸:35ml

碱:40ml

蒸馏时间:5min

2.3.4 仪器自动滴定并给出计算结果。

蛋白质含量  P%=N(%)×6.25

式中:M-标准酸摩尔浓度(mol/L)

W-样品质量(g)

V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL)

V-樣品滴定標準酸消耗量(mL),精確到小數點後四位

3 結果與討論






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