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凱氏定氮法檢測食用菌中蛋白質含量



1 前言

食用菌是真菌中能形成大型子實體,且能供人們食用或藥用的菌類總稱。食用菌產業已成爲中國種植業中的一項重要產業。國內市場潛力巨大。食用菌不僅味美,而且營養豐富,常被人們稱作健康食品,其中含有豐富的蛋白質和氨基酸,其含量是一般蔬菜和水果的幾倍到幾十倍。

2 实验部分

2.1原理

樣品在濃硫酸和催化劑的共同作用下,由有機態的氮轉化爲氨態氮。加鹼蒸餾後,用硼酸吸收後,再以硫酸標準滴定液進行滴定。

2.2 仪器与试剂、器具

2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。

2.2.3 硫酸 分析純,c(HCL)=0.1mol/L,標準滴定液。

2.2.4 硼酸 分析纯,质量分数2%。

2.2.5 氫氧化鈉 分析純,質量分數40%。

2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5+1體積比臨時混合搖勻備用。

2.2.7 催化剂片 3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片

2.2.8 10ml移液管

2.2.9 称量瓶

2.2.10粉碎机

2.3 实验部分

2.3.1製備:將剪碎後的樣品稱取1g左右,用稱量紙包好後一併投入消化管中,加一片催化劑片(或者3g硫酸鉀、0.2g硫酸銅),加入10ml濃硫酸。

2.3.2消解:利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化完畢後,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程採用直線升溫模式,逐漸升溫至420度,消解1小時。

2.3.3 待消化管內溶液冷卻至室溫後,將消化管放置於定氮儀上。定氮儀設置程序如下:

硼酸:35ml

碱:40ml

蒸馏时间:5min

2.3.4 仪器自动滴定并给出计算结果。

蛋白质含量  P%=N(%)×6.25

式中:M-标准酸摩尔浓度(mol/L)

W-样品质量(g)

V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL)

V-樣品滴定標準酸消耗量(mL),精確到小數點後四位

3注意事项

食用菌中含有大量水分,要注意在前處理是儘量不要造成水分的損失,以防止影響實驗的準確度。   




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